Gα13活化试验。MEF细胞分别用LPA(第2道)或不加LPA(1道)处理。细胞裂解物用抗活性Gα13单克l隆抗l体(Cat)孵育。#26902)(顶面板)。这个用抗Gα13兔多克l隆抗l体(Cat)免l疫印迹法检测沉淀活性Gα13#21005年)。底部的面板显示了用抗Gα13的细胞裂解物的Westernblot(5%在顶部面板中使用的)。
Arf样蛋白1(Arl1)是GTpases的Ras超家族中的调控性GTPasesArf家族的成员,并且在整个真核生物中都具有高度保守的直系同源基因。 Arl1对果蝇和秀丽隐杆线虫的早期胚胎发育至关重要。Arl1在主要序列,细胞定位和功能(膜运输调节)上与Arf1-6较相似,Rac1 kit,甚至共享几个共同的结合伴侣。除了其在高尔基体/反式高尔基体网络中的膜运输功能中,还有报道表明Arl1在酵母中的离子稳态中可能发挥作用。
Arf6激l活测定。 经GDP(lane1)或GTPγS(lane 2)处理后,纯化的Arf6蛋白被免l疫沉淀。用抗活性Arf6单克l隆抗l体进行免l疫沉淀。
阳性对照和阴性对照的体外GTPγS/ GDP蛋白质上样量
注意:体内细胞刺激将激l活可用Arf 6的大约10%,而体外GTPγS蛋白负载将激l活Arf 6的将近90%。
1,将0.5 ml每种细胞提取物等分到两个微量离心管中(或使用1 μg纯化的Arf 6蛋白)。
2,向每个试管中加入20 μl 0.5 M EDTA(终浓度为20 mM)。
3,将5 μl 100 XGTPγS(至100 μM,终浓度)加到一个试管中(阳性对照)。
4,在第二个试管中加入5 μl 100 X GDP(至1 mM,终浓度)(阴性对照)。
5,在搅拌下将试管在30°C孵育30分钟。
6,通过将试管放在冰上并添加32.5 μl 1 M MgCl2(至60 mM,终浓度)来停止加载。
武汉纽斯特生物(多图)-Rac1 kit由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。“G蛋白活性,cAMP和cGMPELISA试剂盒,蛋白点突变”选择武汉纽斯特生物技术有限公司,公司位于:湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号光谷生物城B3-3栋3楼,多年来,武汉纽斯特坚持为客户提供好的服务,联系人:黄经理。欢迎广大新老客户来电,来函,亲临指导,洽谈业务。武汉纽斯特期待成为您的长期合作伙伴!