北京/成都/重庆/武汉细胞培养实验室污染空间环境灭菌办法
细胞培养是一种无菌技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物和不受其他有害因素的影响。为防止微生物污染和有害因素的影响,细胞培养室要求环境清洁,空气清新、干燥、无尘。对实验室进行定期清洁、使用高效型消毒剂是避免细胞培养过程中由于实验室环境引起细胞污染的主要措施。
对于细胞培养,污染是Zui大的敌人,不管是设备、试剂亦或是环境造成的污染,这是每个养细胞的同志所头疼的事情。
细胞培养中常见的生物污染,主要包括细菌芽孢污染、霉菌污染、支原体污染、噬菌体污染等。今天主要讲一下噬菌体污染。
噬菌体是一种寄生于细菌上的病毒,可以感染并破坏细菌。噬菌体污染会对实验结果产生影响,影响实验的可重复性和准确性。此外,噬菌体污染还可能导致实验结果的误解和实验人员的健康威胁。
噬菌体的危害
噬菌现象:液体培养基溶氧急剧上升,产生大量气泡,在较短时间内菌体大量自溶,发酵液Zui终变清。固体培养基出现噬菌斑。
利用细菌或放线菌进行的发酵容易受噬菌体的污染,由于噬菌体的感染力非常强,传播蔓延迅速,且较难防治,对发酵生产有很大的威胁。一旦发生噬菌体污染,会导致发酵异常、倒罐,使工业生产遭到严重损失。
噬菌体的防治措施
1.外来可疑菌种一律不做增殖。
2.多菌种交替使用,采用抗噬菌体的感受态。
3.划分大肠杆菌的操作区域,接种区,发酵区,收菌区,菌种保藏区要严格分开。
4.严禁活菌排放,废菌高压灭菌后方可倾倒。
5.规范操作,避免污染。
6.保证洁净,干燥的工作环境。
细胞培养过程中环境污染有哪些途径?
1、取放细胞时引起的污染
细胞培养过程中,取放细胞是Zui基本的操作,培养房开关门的瞬间,环境中的微生物或多或少会进入培养箱中,而且内外温差导致内门冷凝水的产生,极易吸附微生物,都是造成培养箱污染的风险因素。
2、灭菌不彻底造成的二次污染
细胞培养过程中,因其它操作问题(如培养基泼洒,水盘污染等),造成培养房的大规模污染也时常会发生,此时就需要对培养箱进行灭菌消毒,常规的消毒(如紫外照射)只能达到表面消毒的效果,特别是对真菌等顽固性污染,无法进行彻底灭菌,导致后续培养过程中细胞污染频发。
实验室传统消毒方式
在传统的细胞房消毒方法中,Zui常用紫外线、高温、酒精等消毒方式。
1、紫外线消毒
紫外线消毒是通过紫外线杀死或去除微生物。
优势:适合无遮挡敞开型环境和空气消毒,能够在短时间内达到杀菌效果。使用成本相对较低,由于不投加化学药剂,不会对水和环境产生影响。
缺点:杀菌效力较低,无法杀灭霉菌(孢子)、芽孢等高抗性微生物。紫外线灯套容易结垢,需频繁清洗以维持效果,另外紫外线存在老化问题,要求现场操作人员具备较高技术工艺,及时测定衰减程度并进行校正或更换,无法达到可控、可计量的消毒标准。紫外线不能直接照射人体,所以只能在无人情况下使用。受空间环境因素制约,所以通常作为一种辅助性消毒措施。
2、高温消毒
高温消毒是通过高温杀死或去除微生物。高温消毒有很多优点,例如能够杀死微生物的内部、不会产生化学残留物等。但是,高温消毒也有一些缺点。首先,高温消毒需要使用高温设备,这会增加成本。其次,高温消毒需要一定的时间,因此需要进行计划和安排。Zui后,高温消毒可能会对一些细胞培养物造成损伤。
3、酒精擦拭消毒
酒精擦拭消毒是常见的一种消毒方法,但酒精易挥发,不稳定。只能用于物体表面消毒,其消毒主要针对普通细菌,对高抗性的芽孢、霉菌等无效。
70%-75%乙醇优势是对细菌具有较好的杀灭作用,但对真菌的效力有限,可以使用诺福消毒液来解决乙醇无法较好解决的酵母、霉菌、芽孢、噬菌体等污染问题。
对于各种细胞培养实验室来说,Zui重要的是杜绝一切可能的污染源,防范于未然。
当实验室发生支原体和噬菌体污染时,应该采用有效的消毒方法进行清理。西安克微生物专业解决细胞间支原体污染、真菌污染问题、噬菌体污染问题、黑胶虫污染问题,治理经验丰富,可提供上门消毒服务和指导。
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